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elisa試劑盒分析技術(shù)的發(fā)展歷史
更新時(shí)間:2016-07-01   點(diǎn)擊次數(shù):1172次

   elisa實(shí)驗(yàn)(ELISA/EIA,簡(jiǎn)稱“酶免試驗(yàn)”)是一項(xiàng)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)基本的、常規(guī)的檢測(cè)技術(shù)。盡管在90年代初期,由于以聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)為代表分子生物學(xué)水平技術(shù)的發(fā)明,人們紛紛預(yù)測(cè),酶免試驗(yàn)將被更高靈敏度、數(shù)信號(hào)放大的、病原體水平檢測(cè)的核酸放大試驗(yàn)(NAT)所取代。但由于免疫標(biāo)志物(抗原/抗體)具有無(wú)法替代的意義,以及酶免試驗(yàn)具有操作簡(jiǎn)便、技術(shù)可靠,特別是,90年代末期ELISA檢測(cè)系統(tǒng)的靈敏度和特異性以及檢測(cè)過程的自動(dòng)化得到了顯著提高與完善,因此,酶免試驗(yàn)再也沒人懷疑將被淘汰,而成為傳染病血清學(xué)標(biāo)志物(如肝炎、艾滋、致畸病原Torch)、腫瘤標(biāo)志物及內(nèi)分泌等各種免疫指標(biāo)檢測(cè)的主導(dǎo)技術(shù)。

    支持酶免試驗(yàn)技術(shù)的進(jìn)步,酶標(biāo)板檢測(cè)儀器朝著二個(gè)方向快速發(fā)展。一方面,側(cè)重酶免試驗(yàn)的光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)----酶標(biāo)儀,到90年代末已達(dá)到狀態(tài);隨著納米技術(shù)微量加樣的發(fā)展,酶標(biāo)儀將很容易由檢測(cè)傳統(tǒng)的96微孔板,轉(zhuǎn)化為檢測(cè)384微孔板,甚至1536微孔板,達(dá)到更高的檢測(cè)效率。

    另一方面,側(cè)重酶免試驗(yàn)處理過程技術(shù)----酶標(biāo)分析系統(tǒng),到90年代末也已充分發(fā)展;隨著多任務(wù)軟件,如O/S2,Unix及Windows NT等操作平臺(tái)的完善,滿足現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室GMP/GLP要求的全自動(dòng)酶標(biāo)分析系統(tǒng),正在世界各種實(shí)驗(yàn)室普及。應(yīng)當(dāng)指出,在發(fā)達(dá)國(guó)家全自動(dòng)酶標(biāo)分析系統(tǒng)的進(jìn)步,是由法規(guī)要求嚴(yán)格、酶免試驗(yàn)結(jié)果至關(guān)重要的血站實(shí)驗(yàn)室需求推動(dòng)的。這是因?yàn)?,不同于病人檢測(cè)結(jié)果,僅是醫(yī)生診斷的參考數(shù)據(jù),血站血液篩查實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)結(jié)果判定,將直接決定血液的安全性。

    以日本為代表的“全面實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化”(TLA)運(yùn)動(dòng),對(duì)于全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)產(chǎn)生了巨大的需求。在90年代初期,手工酶免試驗(yàn)操作曾經(jīng)成為TLA的主要障礙。目前,由于全面實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化具有標(biāo)準(zhǔn)化、率、高質(zhì)量的自動(dòng)化與網(wǎng)絡(luò)化特征,正成為實(shí)驗(yàn)室發(fā)展的新趨勢(shì)。

    酶免試驗(yàn)自動(dòng)化與網(wǎng)絡(luò)化的時(shí)代已經(jīng)到來,全面實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化不再是一種模型。了解這些技術(shù)進(jìn)步將有助于實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)與發(fā)展。

一、樣本處理自動(dòng)化

    根據(jù)美國(guó)病理學(xué)院(CAP)的調(diào)查報(bào)告,實(shí)驗(yàn)室誤差(ERROR)產(chǎn)生原因的79%因素,是因?yàn)閷?shí)驗(yàn)過程中樣本處理不當(dāng)造成的。

    區(qū)別與其他檢驗(yàn)技術(shù)針對(duì)于每一反應(yīng)單元對(duì)應(yīng)于一份標(biāo)本,酶免試驗(yàn)的樣本處理必須基于批量化操作----96孔酶標(biāo)板。*代多功能(Robotic)樣本處理機(jī),是由瑞士哈美頓(HAMILTON)公司開發(fā)于1985年上市的Microlab 2200。這是一臺(tái)基于機(jī)械臂運(yùn)動(dòng)和稀釋分配器(Diluter)原理,采用8或12根固定距離的特弗隆探針,由BASIC程序控制的樣本處理機(jī)。

    隨著酶免試驗(yàn)的普及,基于稀釋分配器原理的樣本處理機(jī)得到快速發(fā)展,先后有數(shù)家廠商開發(fā)了十余種樣本處理機(jī),以滿足實(shí)驗(yàn)室液體處理需要。如瑞士哈美頓公司的Microlab 4000等。

  

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